PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书
产品详情
klentaq-s 测序酶是taq dna 聚合酶的改造版，为 taq dna 聚合酶的大片段，并做了基因突变。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通taq dna 聚合酶，klentaq-s 测序酶具有很强的 ddntp 的渗入能力，因此其适用于终止法 dna 测序或焦磷酸解反应 snp 分析。
本公司 klentaq-s 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。
活性定义活性单位指在 72℃下， 1×am pcr buffer 1，30 min 内将 10 nmole dntp 掺入酸不溶性物质所需的酶量。
特点
1.尤其适合 ddntp 等修饰核苷酸的掺入反应
2.相比全长 taq dna 聚合酶，本酶比活性有所降低
适用范围
ddntp 终止法dna 测序（一代测序）
焦磷酸解反应延伸法 snp 分析
质量控制
经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
20 mm tris-hcl (ph 8.0), 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0.1 mm edta, 0.5% nonidet p40, 0.5%tween20, and 50% glycerol.
应用举例
以下反应举例为 50 μl 标准 pcr 体系，仅供参考。实际 pcr 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
1） 按下表配制反应体系
组份
体积/μl
终浓度
10×am pcr buffer 1
5
1×
dntps（2.0 mm）
5
0.2 mm
引物 f（10 μm）
1.5
0.3 μm
引物r（10 μm）
1.5
0.3 μm
template
varable*
/
klentaq-s测序酶（5u/μl）
0.5
2.5u
ddh2o
varable
/
总体积
50
/
*模板dna用量参数(50 μl反应体系):
人基因组dna100-1000 ng ; 微生物基因组dna 10-100ng；pcr产物 1 ng-10 ng； plasmid dna 5-30 ng ; cdna from rt reaction 1-5 μl 。
2） 按如下条件进行反应，
95℃
2-5 min
95℃
15 sec
25-35 cycles
55~72℃
20 sec
72℃
1kb/min
72℃
5 min
3） 琼脂糖凝胶电泳检测pcr 产物，或按实验目的进行后续操作。
运输与保存
-20℃可保存 2 年，避免反复冻融
注意事项
1.pcr 条件和野生型 taq dna 聚合酶类似，对特定 dna 的测序反应可能需要优化。2.本酶扩增能力较野生型 taq dna 聚合酶有所降低，pcr 产量有所降低，不建议用于常规 pcr。3.不可用于 taqman 探针法 q-pcr。 浓度5u/ul
货号 品名 规格 品牌
78bea10012-250u pap（klentaq-s 测序酶） 250u biohub
78bea10012-1250u pap（klentaq-s 测序酶） 1250u biohub
78bea10012-5000u pap（klentaq-s 测序酶） 5000u biohub
78bea10012-12500u pap（klentaq-s 测序酶） 12500u biohub
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本公司 klentaq-s 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。
活性定义活性单位指在 72℃下， 1×am pcr buffer 1，30 min 内将 10 nmole dntp 掺入酸不溶性物质所需的酶量。
特点
1.尤其适合 ddntp 等修饰核苷酸的掺入反应
2.相比全长 taq dna 聚合酶，本酶比活性有所降低
适用范围
ddntp 终止法dna 测序（一代测序）
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质量控制
经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
20 mm tris-hcl (ph 8.0), 100 mm kcl, 1 mm dtt, 0.1 mm edta, 0.5% nonidet p40, 0.5%tween20, and 50% glycerol.
应用举例
以下反应举例为 50 μl 标准 pcr 体系，仅供参考。实际 pcr 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
1） 按下表配制反应体系
组份
体积/μl
终浓度
10×am pcr buffer 1
5
1×
dntps（2.0 mm）
5
0.2 mm
引物 f（10 μm）
1.5
0.3 μm
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1.5
0.3 μm
template
varable*
/
klentaq-s测序酶（5u/μl）
0.5
2.5u
ddh2o
varable
/
总体积
50
/
*模板dna用量参数(50 μl反应体系):
人基因组dna100-1000 ng ; 微生物基因组dna 10-100ng；pcr产物 1 ng-10 ng； plasmid dna 5-30 ng ; cdna from rt reaction 1-5 μl 。
2） 按如下条件进行反应，
95℃
2-5 min
95℃
15 sec
25-35 cycles
55~72℃
20 sec
72℃
1kb/min
72℃
5 min
3） 琼脂糖凝胶电泳检测pcr 产物，或按实验目的进行后续操作。
运输与保存
-20℃可保存 2 年，避免反复冻融
注意事项
1.pcr 条件和野生型 taq dna 聚合酶类似，对特定 dna 的测序反应可能需要优化。2.本酶扩增能力较野生型 taq dna 聚合酶有所降低，pcr 产量有所降低，不建议用于常规 pcr。3.不可用于 taqman 探针法 q-pcr。 浓度5u/ul
货号 品名 规格 品牌
78bea10012-250u pap（klentaq-s 测序酶） 250u biohub
78bea10012-1250u pap（klentaq-s 测序酶） 1250u biohub
78bea10012-5000u pap（klentaq-s 测序酶） 5000u biohub
78bea10012-12500u pap（klentaq-s 测序酶） 12500u biohub
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