液相色谱仪（HPLC）检测饲料中L-肉碱方案
液相色谱仪(hplc)检测饲料中l-肉碱方案
旋肉碱（l-肉碱）又称肉毒碱，是一种水溶性氨基酸，由赖氨酸衍生而来。分子结构为l-γ-*胺β-羟丁酸，分子式为c7h16no3，分子量为161.2。它是b族维生素类似物，曾被称为维生素bt。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基，其饱和键和极性官能团有良好的水溶性和吸湿性，200℃以上它仍稳定存在，可在ph3~6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将l-肉碱批准为食品添加剂，列入营养强化剂类。
莱顿公司推荐液相色谱仪-检测饲料中l-肉碱的含量，得出的结果准确可靠，供广大用户参考。
以下是饲料中l-肉碱的详细检测方法。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
液相色谱仪
液相色谱柱 c18250mm×4.6mm×5μm
实验室常用仪器设备
超声波水浴
分析天平（感量0.001g）
0.45μm水性滤膜
1.2 试剂
异丙醇，色谱纯。
甲醇，色谱纯。
乙腈，色谱纯。
*。
磷酸二氢钾。
三乙醇胺。
柠檬酸。
氧化银。
肉碱衍生剂。
2 测定原理
样品经加乙醇超声提取后，然后加入肉碱衍生剂，将衍生物注入液相色谱反相柱上进行分离，用紫外检测器在210nm波长处定量测定。
3 试样溶液的制备
称取5g试样于100ml烧杯中，加入30ml无水乙醇，溶解并转移至100ml容量瓶中，先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯，样液转移至100ml容量瓶中，超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度，混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml，加入肉碱衍生剂0.25ml（衍生剂配制方法：40 mg p-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈，加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl），混合后置于60℃恒温水温箱120 min，吸取20 µl进样分析。
4 色谱条件
色谱柱：c18柱 250mm×4.6mm×5μm；
流动相：甲醇：磷酸盐=5:95
流速：1.0ml/min；
温度：室温；
进样量：20μl；
检测波长：210nm。
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苏州市莱顿科学仪器有限公司
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莱顿公司推荐液相色谱仪-检测饲料中l-肉碱的含量，得出的结果准确可靠，供广大用户参考。
以下是饲料中l-肉碱的详细检测方法。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
液相色谱仪
液相色谱柱 c18250mm×4.6mm×5μm
实验室常用仪器设备
超声波水浴
分析天平（感量0.001g）
0.45μm水性滤膜
1.2 试剂
异丙醇，色谱纯。
甲醇，色谱纯。
乙腈，色谱纯。
*。
磷酸二氢钾。
三乙醇胺。
柠檬酸。
氧化银。
肉碱衍生剂。
2 测定原理
样品经加乙醇超声提取后，然后加入肉碱衍生剂，将衍生物注入液相色谱反相柱上进行分离，用紫外检测器在210nm波长处定量测定。
3 试样溶液的制备
称取5g试样于100ml烧杯中，加入30ml无水乙醇，溶解并转移至100ml容量瓶中，先后用10ml无水乙醇分3次洗涤烧杯，样液转移至100ml容量瓶中，超声提取10min后用无水乙醇定容至刻度，混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml，加入肉碱衍生剂0.25ml（衍生剂配制方法：40 mg p-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈，加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl），混合后置于60℃恒温水温箱120 min，吸取20 µl进样分析。
4 色谱条件
色谱柱：c18柱 250mm×4.6mm×5μm；
流动相：甲醇：磷酸盐=5:95
流速：1.0ml/min；
温度：室温；
进样量：20μl；
检测波长：210nm。
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