犬肌钙蛋白Ielisa检测试剂盒试剂配制
犬肌钙蛋白ielisa检测试剂盒试剂配制:
1、犬肌钙蛋白ielisa检测试剂盒说明书酶联板（assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（sample diluent）：1×20ml/瓶。
4、标记抗体稀释液（biotin-antibody diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （hrp-avidin diluent）：1×10ml/瓶。
6、标记抗体（biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（hrp-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（tmb substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（wash buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（stop solution）：1×10ml/瓶（2n h2so4）。
当钙离子浓度升高到一定程度时， tnc与钙离子结合，导致其构型发生改变，并将此效应传递到肌钙蛋白，tni的构型随之发生改变，与肌动-原肌球蛋白脱离，抑制作用被解除，横桥atpase被激活，细肌丝发生滑动，肌肉表现出收缩性。所提供的elisa kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂（elisa）。预先包被的犬ctni抗体为多克隆犬ctni抗体。检测相犬ctni抗体也为多克隆犬ctni抗体，经生物（biotin）标记。样品和生物标记犬ctni抗体先后加入酶标板孔反应后，pbs或tbs洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过pbs或tbs的*洗涤后用底物tmb显色。
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5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （hrp-avidin diluent）：1×10ml/瓶。
6、标记抗体（biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（hrp-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（tmb substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（wash buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
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