CRISPR系统的实际应用，PCR Clean™助力科研
crispr是一种常见的基因编辑技术。此类操作对实验室中，核酸污染的控制有比较高的要求。德国mb公司生产的pcr clean™，即用型核酸污染祛除喷雾，可直接喷洒在待清洁物品表面，风干即可，便捷高效地清除dna、rna, 以及dna酶、rna酶等核酸污染。
crispr系统在生物学相关的许多领域，都有应用。近日，发表在《nature》上，标题为：“cd300ld on neutrophils is required for tumour-driven immune suppression”的文章，在肿瘤小鼠模型中进行了体内crispr-cas9筛选，并确定cd300ld是肿瘤有利受体的关键候选。
免疫检查点阻断在肿瘤治疗中取得了相当大的成功。然而，很大一部分患者对这些治疗只有很小的反应，甚至没有反应。以骨髓细胞含量高为特征的免疫抑制肿瘤微环境(tme)是有效免疫治疗的主要障碍。
中性粒细胞是一种数量丰富且种类繁多的髓样细胞，提供先天防御急性感染或炎症。在癌症和其他病理性慢性炎症的情况下，异常的粒细胞生成显著增加骨髓中中性粒细胞的释放。这些中性粒细胞在功能上受到干扰，特别是在晚期癌症中，表现出高度的可塑性，并促进了肿瘤发生的直接和间接机制。这种病理活化的中性粒细胞表现出强大的免疫抑制活性，在功能上被命名为pmn-mdscs或粒细胞髓源性抑制细胞(g-mdscs)，在小鼠和人类肿瘤发生中成为tme的关键组成部分。
多种中性粒细胞发育状态在肿瘤中共存。pmn-mdscs和经典中性粒细胞具有相同的髓系起源和表面标记，然而，它们在功能上是不同的，并且很少有原型遗传和表型标记来区分它们。在肿瘤环境中，大多数中性粒细胞被证明是具有免疫抑制活性的pmn-mdscs。pmn-mdscs在大多数类型的癌症中扩增，促进肿瘤进展并导致对免疫治疗的不良反应。需要鉴定参与pmn-mdscs募集和功能的关键分子，以选择性地靶向pmn-mdscs进行肿瘤治疗。
在这项研究中，科研人员通过表征细胞表面蛋白，确定cd300ld是pmn-mdscs中存在的关键免疫抑制因子，为癌症免疫治疗提供了克服tme免疫抑制的潜在靶点。
总结：
科研人员通过在肿瘤小鼠模型中进行了体内crispr-cas9筛选，确定cd300ld是肿瘤有利受体的候选。cd300ld在正常中性粒细胞中特异性表达，在pmn-mdscs中发生肿瘤后表达上调。cd300ld敲除以pmn - mdsc依赖的方式抑制多种肿瘤类型的发展。cd300ld是pmn-mdscs募集进入肿瘤及其抑制t细胞激活功能所必需的。cd300ld通过stat3-s100a8/a9轴起作用，敲除cd300ld逆转肿瘤免疫抑制微环境。cd300ld在人类癌症中表达上调，并与患者生存表现出不利的相关性。阻断cd300ld活性可抑制肿瘤发展，并与抗pd1具有协同作用。我们的研究发现cd300ld是pmn-mdscs中一个关键的免疫抑制因子，是肿瘤免疫抵抗所必需的，并为癌症免疫治疗提供了一个潜在的靶点。
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多种中性粒细胞发育状态在肿瘤中共存。pmn-mdscs和经典中性粒细胞具有相同的髓系起源和表面标记，然而，它们在功能上是不同的，并且很少有原型遗传和表型标记来区分它们。在肿瘤环境中，大多数中性粒细胞被证明是具有免疫抑制活性的pmn-mdscs。pmn-mdscs在大多数类型的癌症中扩增，促进肿瘤进展并导致对免疫治疗的不良反应。需要鉴定参与pmn-mdscs募集和功能的关键分子，以选择性地靶向pmn-mdscs进行肿瘤治疗。
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总结：
科研人员通过在肿瘤小鼠模型中进行了体内crispr-cas9筛选，确定cd300ld是肿瘤有利受体的候选。cd300ld在正常中性粒细胞中特异性表达，在pmn-mdscs中发生肿瘤后表达上调。cd300ld敲除以pmn - mdsc依赖的方式抑制多种肿瘤类型的发展。cd300ld是pmn-mdscs募集进入肿瘤及其抑制t细胞激活功能所必需的。cd300ld通过stat3-s100a8/a9轴起作用，敲除cd300ld逆转肿瘤免疫抑制微环境。cd300ld在人类癌症中表达上调，并与患者生存表现出不利的相关性。阻断cd300ld活性可抑制肿瘤发展，并与抗pd1具有协同作用。我们的研究发现cd300ld是pmn-mdscs中一个关键的免疫抑制因子，是肿瘤免疫抵抗所必需的，并为癌症免疫治疗提供了一个潜在的靶点。
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