实验室常用多种缓冲液配置方案
1、1 m tris-hcl (ph7.4, 7.6, 8.0)
组份浓度：1 m tris-hcl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量121.1 g tris置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的ph值。
ph值 浓hcl
7.4 约70ml
7.6 约60ml
8.0 约42ml
4. 将溶液定容至1 l。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。
2、10×te buffer (ph7.4, 7.6, 8.0)
组份浓度：100 mm tris-hcl, 10 mm edta
配制量：1 l
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 l烧杯中。
1m tris－hcl buffer（ph7.4，7.6，8.0） 100ml
500mm edta(ph8.0) 20ml
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 l后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3、1.5 m tris-hcl (ph8.8)
组份浓度：1.5 m tris-hcl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量181.7 g tris置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节ph值至8.8。
4. 将溶液定容至1 l。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。
4、3 m 醋酸钠(ph5.2)
组份浓度：3m 醋酸钠
配制量：100ml
配制方法：
1.称量40.8g naac·3h2o置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解
2.加入冰醋酸调节ph值至5.2
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后，室温保存。
5、pbs buffer
组份浓度：137 mm nacl, 2.7 mm kcl, 10 mm na2hpo4, 2 mm kh2po4
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量下列试剂，置于1 l烧杯中。
nacl 8g
kcl 0.2g
na2hpo4 1.42g
kh2po4 0.27g
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将ph值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 l。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述pbs buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mm cacl2和0.5 mm mgcl2。
6、10 m 醋酸铵
组份浓度：10 m 醋酸铵
配制量：100 ml
配制方法：
1. 称量77.1 g醋酸铵置于100～200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 使用0.22 mm滤膜过滤除菌。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7、苯ben酚/lv仿/yi戊醇 (25 : 24 : 1)
配制方法：
1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯ben酚/lv仿/yi戊醇（25 : 24 : 1)。lv仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法：将tris-hcl平衡ben酚与等体积的lv仿/yi戊醇（24 : 1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
8、10％ (w/v) sds
组份浓度：10％ (w/v)sds
配制量：100ml
配制方法：
1.称量10g高纯度的sds置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解
2.滴加浓盐酸调节ph值至7.2
3.将溶液定容至100ml后，室温保存。
9、2 n naoh
组份浓度：2 n naoh
配制量：100 ml
配制方法：
1. 量取80 ml去离子水置于100～200 ml塑料烧杯中（naoh溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8 g naoh小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3. 待naoh完wan全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100 ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
10、2.5 n hcl
组份浓度：2.5 n hcl
配制量：100 ml
配制方法：
1. 在78.4 ml的去离子水中加入21.6 ml的浓盐酸（11.6 n)，均匀混合。
2. 室温保存。
11、5 m nacl
组份浓度：5 m nacl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称取292.2 g nacl置于1 l烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1 l后，适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
12、20％ (w/v) glucose
组份浓度：20％ (w/v) glucose
配制量：100 ml
配制方法：
1. 称取20 g glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
13、solution i(质粒提取用)
组份浓度：25 mm tris-hcl（ph8.0), 10 mm edta, 50 mm glucose
配制量：1 l
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 l烧杯中。
1m tris-hcl（ph8.0） 25ml
0.5m edta（ph8.0） 20ml
20％glucose（1.11m） 45ml
dh2o 910ml
2. 高温高压灭菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 ml的solution i中加入2 ml的rnase a（20 mg/ml)。
14、solution ii(质粒提取用)
组份浓度：200mm naoh，1％(w/v)sds
配制量：500ml
配制方法：
1.量取下列溶液，置于500ml烧杯中
10％ sds 50ml
2n naoh 50ml
2.加灭菌水定容至500ml，充分混匀
3.室温保存，此溶液保存时间最好不要超过一个月
注意：sds易产生气泡，不要剧烈搅拌
15、solution iii(质粒提取用)
组份浓度：3 m koac, 5 m ch3cooh
配制量：500 ml
配制方法：
1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
koac 147g
ch3cooh 57.5ml
2. 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
16、0.5 m edta(ph8.0)
组份浓度：0.5 m edta
配制量：1 l
配制方法：
称取186.1 g na2edta·2h2o，置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用naoh调节ph值至8.0（约20 g naoh)。
注意：ph值至8.0时，edta才能完wan全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1 l。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
17、1 m dtt
组份浓度：1 m dtt
配制量：20 ml
配制方法：
1. 称取3.09 g dtt，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的0.01 m naoac（ph5.2)，溶解后使用0.22 mm滤器过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
18、10 mm atp
组份浓度：10 mm atp
配制量：20 ml
配制方法：
1. 称取121 mg na2atp·3h2o，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的25 mm tris-hcl（ph8.0)，搅拌溶解。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
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组份浓度：1 m tris-hcl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量121.1 g tris置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的ph值。
ph值 浓hcl
7.4 约70ml
7.6 约60ml
8.0 约42ml
4. 将溶液定容至1 l。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。
2、10×te buffer (ph7.4, 7.6, 8.0)
组份浓度：100 mm tris-hcl, 10 mm edta
配制量：1 l
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 l烧杯中。
1m tris－hcl buffer（ph7.4，7.6，8.0） 100ml
500mm edta(ph8.0) 20ml
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定容至1 l后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3、1.5 m tris-hcl (ph8.8)
组份浓度：1.5 m tris-hcl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量181.7 g tris置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节ph值至8.8。
4. 将溶液定容至1 l。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定ph值，因为tris溶液的ph值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的ph值大约降低0.03个单位。
4、3 m 醋酸钠(ph5.2)
组份浓度：3m 醋酸钠
配制量：100ml
配制方法：
1.称量40.8g naac·3h2o置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解
2.加入冰醋酸调节ph值至5.2
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后，室温保存。
5、pbs buffer
组份浓度：137 mm nacl, 2.7 mm kcl, 10 mm na2hpo4, 2 mm kh2po4
配制量：1 l
配制方法：
1. 称量下列试剂，置于1 l烧杯中。
nacl 8g
kcl 0.2g
na2hpo4 1.42g
kh2po4 0.27g
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加浓盐酸将ph值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 l。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述pbs buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mm cacl2和0.5 mm mgcl2。
6、10 m 醋酸铵
组份浓度：10 m 醋酸铵
配制量：100 ml
配制方法：
1. 称量77.1 g醋酸铵置于100～200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 使用0.22 mm滤膜过滤除菌。
4. 密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7、苯ben酚/lv仿/yi戊醇 (25 : 24 : 1)
配制方法：
1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯ben酚/lv仿/yi戊醇（25 : 24 : 1)。lv仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配制方法：将tris-hcl平衡ben酚与等体积的lv仿/yi戊醇（24 : 1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
8、10％ (w/v) sds
组份浓度：10％ (w/v)sds
配制量：100ml
配制方法：
1.称量10g高纯度的sds置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解
2.滴加浓盐酸调节ph值至7.2
3.将溶液定容至100ml后，室温保存。
9、2 n naoh
组份浓度：2 n naoh
配制量：100 ml
配制方法：
1. 量取80 ml去离子水置于100～200 ml塑料烧杯中（naoh溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8 g naoh小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3. 待naoh完wan全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100 ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
10、2.5 n hcl
组份浓度：2.5 n hcl
配制量：100 ml
配制方法：
1. 在78.4 ml的去离子水中加入21.6 ml的浓盐酸（11.6 n)，均匀混合。
2. 室温保存。
11、5 m nacl
组份浓度：5 m nacl
配制量：1 l
配制方法：
1. 称取292.2 g nacl置于1 l烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1 l后，适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
12、20％ (w/v) glucose
组份浓度：20％ (w/v) glucose
配制量：100 ml
配制方法：
1. 称取20 g glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
13、solution i(质粒提取用)
组份浓度：25 mm tris-hcl（ph8.0), 10 mm edta, 50 mm glucose
配制量：1 l
配制方法：
1. 量取下列溶液，置于1 l烧杯中。
1m tris-hcl（ph8.0） 25ml
0.5m edta（ph8.0） 20ml
20％glucose（1.11m） 45ml
dh2o 910ml
2. 高温高压灭菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 ml的solution i中加入2 ml的rnase a（20 mg/ml)。
14、solution ii(质粒提取用)
组份浓度：200mm naoh，1％(w/v)sds
配制量：500ml
配制方法：
1.量取下列溶液，置于500ml烧杯中
10％ sds 50ml
2n naoh 50ml
2.加灭菌水定容至500ml，充分混匀
3.室温保存，此溶液保存时间最好不要超过一个月
注意：sds易产生气泡，不要剧烈搅拌
15、solution iii(质粒提取用)
组份浓度：3 m koac, 5 m ch3cooh
配制量：500 ml
配制方法：
1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
koac 147g
ch3cooh 57.5ml
2. 加入300 ml去离子水后搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
16、0.5 m edta(ph8.0)
组份浓度：0.5 m edta
配制量：1 l
配制方法：
称取186.1 g na2edta·2h2o，置于1 l烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用naoh调节ph值至8.0（约20 g naoh)。
注意：ph值至8.0时，edta才能完wan全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1 l。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
17、1 m dtt
组份浓度：1 m dtt
配制量：20 ml
配制方法：
1. 称取3.09 g dtt，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的0.01 m naoac（ph5.2)，溶解后使用0.22 mm滤器过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
18、10 mm atp
组份浓度：10 mm atp
配制量：20 ml
配制方法：
1. 称取121 mg na2atp·3h2o，加入到50 ml塑料离心管内。
2. 加20 ml的25 mm tris-hcl（ph8.0)，搅拌溶解。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
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